기술 데이터
컬럼/담수화 플레이트 sephadex g-25 사용 설명서
제품 소개
Dextran G-25 담수화 컬럼/플레이트는 주로 네트워크 구조를 가진 덱스트란의 겔 중합체 화합물에서 분자체 기능을 사용합니다. 분리된 물질의 분자량 크기가 다르기 때문에 분리된 물질이 G-25 겔을 통과할 때 분자량이 큰 물질(예: 단백질)은 겔 입자 외부에서 차단되어 겔 입자 사이의 틈을 통해 유출됩니다. 이 과정은 짧고 이동 속도가 빠르기 때문에 분자량이 큰 물질이 먼저 컬럼/플레이트에서 유출됩니다. 분자량이 작은 물질(예: 염)은 겔 입자의 미세 기공으로 침투할 수 있으며, 이 과정은 길고 느리며, 분자량이 큰 물질은 겔 컬럼/플레이트에서 유출되는 데 더 오랜 시간이 걸리므로 최종적으로 세척되어 물질이 분리됩니다.
Sephadex G-25 시리즈 미디어의 매개변수는 표에 나와 있습니다.
| 프로젝트 | 매개변수적 |
| 특징 | 더티 화이트 젤 |
| 평균 입자 크기(건조) | 150±100μm 92.8 |
| 입자 크기 분포(45-165μm)% | ≥80 |
| 스플릿 레인지(포르투갈어) | 100-5000 |
| 분리 범위(글로불린) | 1000-5000 |
| 물 비율(젖은 접착제 ml/건조 분말 g) | 2.3-2.7 |
| 선형 유량(0.3MPA, cm/h) | 697.1 |
| 최대 유량(cm/h) | 150 |
| 보존 솔루션 | 0.2M NaAc 20% 에탄올 |
| 보관 조건 | 4'C-30'C |
모델 번호 G는 젤 1g당 흡수된 물의 양을 나타냅니다. 예를 들어, G-25 젤 매체는 건조 젤 1g당 2.5ml의 물이 흡수된다는 것을 나타냅니다. 즉, 젤 팽창 계수이며, 이는 젤 입자의 기공 크기이기도 합니다.
Sephadex G-25 시리즈 크로마토그래피 매체는 완충액 교환, 단백질 탈염, 다양한 분자량의 단백질 분리 등에 널리 사용됩니다. 탈염 및 완충을 위한 최대 샘플 용량은 컬럼 베드 용량의 최대 30%까지 가능합니다.
워크플로
1. 스피커/태블릿 균형 맞추기: G-25 Sefadex가 미리 주입된 스피커/태블릿을 수직으로 세운 후, 컬럼 층 부피의 5~10배 용량의 완충액을 사용하여 G-25 탈염 컬럼/태블릿의 균형을 맞춥니다. (참고: 완충액은 교체할 완충액(예: PBS, 탈이온수 등)을 사용하세요. 유량을 조절하는 데 주의하세요.)
2. 샘플링: 겔 컬럼/플레이트와 완충액의 균형을 맞춘 후, 샘플을 피펫으로 옮겨 겔 표면의 체에 천천히 넣고, 하단 캡을 열어 샘플이 겔과 같은 높이가 될 때까지 천천히 겔에 주입합니다. (참고: 하단 샘플 용량은 일반적으로 컬럼 층 용량의 10~30%이며, 샘플 점도가 너무 높으면 G25 글랜드의 수명이 단축됩니다.)
3. 용출: 샘플이 겔에 완전히 들어간 후 용출 완충액으로 용출합니다. (참고: 권장 샘플 유속은 약 1~2ml/분입니다. 용출량은 일반적으로 샘플량의 1.2~2.0배입니다.)
4. 정제 및 재생: 일부 단백질은 식염수에서 변성되므로 컬럼 베드를 0.2 M NaOH 또는 다른 비이온성 세제로 세척하여 이러한 단백질을 정제해야 할 수도 있습니다.
5. 보관: 실험 후 0.02% 아지드나트륨 용액 또는 20% 에탄올 용액에 보관하세요.